VIASURE E. coli EHEC + EPEC + EIEC Real Time PCR Detection Kit está diseñado para la identificación y diferenciación específica de Escherichia coli enterohemorrágica EHEC, Escherichia coli productora de toxina Shiga (STEC), Escherichia coli enteropatogénica EPEC y Escherichia coli enteroinvasiva EIEC/Shigella en muestras de heces humanas procedentes de pacientes con signos y síntomas de infección gastrointestinal.

El uso previsto del test es facilitar el diagnóstico de infección producida por EHEC, STEC, EPEC y/o EIEC/Shigella en combinación con factores de riesgos clínicos y epidemiológicos.

El DNA es extraído a partir de las muestras fecales, amplificado posteriormente mediante PCR a tiempo real y detectado utilizando oligonucleótidos específicos y una sonda marcada con una molécula fluorescente y otra apantalladora (quencher) para detectar EHEC, STEC, EPEC y/o EIEC/Shigella.

Escherichia coli (E. coli) es un microorganismo gramnegativo que puede ser un residente inocuo del tracto gastrointestinal, pero también tiene la capacidad patogénica de causar enfermedad entérica y enfermedades extraintestinales, como infecciones del tracto urinario (UTIs) y sepsis / meningitis. Las variantes patógenas de E. coli (patovares o patotipos) causan mucha morbilidad y mortalidad en todo el mundo, debido a que tienen bajas dosis infecciosas y se transmiten a través de medios ubicuos, como alimentos y agua. De las cepas que causan enfermedades diarreicas, se reconocen seis patotipos: E. coli enterohemorrágica (ECEH), E. coli enterotoxigénica (ETEC), E. coli enteroinvasiva (EIEC), E. coli enteropatogénica (EPEC), E. coli enteroagregativa. (EAggEC) y E. coli difusamente adherentes (DAEC). Además, las diferentes cepas de E. coli pueden pertenecer a más de un grupo de patotipos debido a la expresión de los diferentes factores de virulencia.

E. coli enterohemorrágica (EHEC) es un subconjunto de E. coli productora de toxina Shiga (STEC), también llamada E. coli productora de verotoxina. Los STEC son un grupo diverso de patógenos transmitidos por los alimentos, que causan un amplio espectro de enfermedades humanas, que van desde la diarrea leve hasta enfermedades humanas graves, incluida la colitis hemorrágica (HC) y una complicación potencialmente mortal del síndrome urémico hemolítico (HUS). Su virulencia está relacionada en parte con su capacidad para producir Stx1 y / o Stx2, citotoxinas potentes que inhiben la síntesis de proteínas de la célula huésped. Además, las EHEC típicas a menudo se caracterizan por la producción de una proteína de membrana externa llamada intimina, la cual es codificada por el gen eae. Esta proteína media tanto en la unión firme de las bacterias a los enterocitos, como en las lesiones (tanto de unión como de borrado (lesiones A / E)) en el colon. Las cepas de STEC y EHEC se pueden transmitir en los humanos mediante el contacto de persona a persona; consumo de carne cruda o poco cocinada, leche cruda y otros productos lácteos; ingestión de otros alimentos o agua potable contaminada con heces de animales; contacto directo con el ganado doméstico y rumiantes que son reconocidos como reservorio principal de las cepas, y agua de baño / recreativa contaminada. Las cepas de STEC más clínicamente relevantes pertenecen al serotipo O157: H7, seguido de O26: H11, O103: H2, O111: H8 y O145: H28.

La E. coli enteropatógena (EPEC) también contiene eae como EHEC, pero sin toxina tipo shiga. EPEC se adhiere a los enterocitos del intestino delgado y destruye la arquitectura microvillar normal, induciendo la lesión característica de fijación y borrado. EPEC es una causa importante de diarrea infantil potencialmente mortal en los países en desarrollo que a menudo se acompaña de fiebre, vómitos y deshidratación en niños menores de 2 años. Se transmite a través de la ruta fecal-oral a través de superficies contaminadas, líquidos de destete y portadores humanos.

Las E. coli Enteroinvasivas (EIEC) están bioquímicamente, genéticamente y patogénicamente estrechamente relacionados con Shigella spp. Ambas bacterias expresan el gen del antígeno plasmídico de invasión H (ipaH) que está relacionado con la invasión. Hay cuatro especies de Shigella responsables de la enfermedad humana (S. dysenteriae, S. flexneri, S. sonnei y S. boydii), que causan diversos grados de disentería. Esta infección se caracteriza por fiebre, calambres abdominales y diarrea que contiene sangre y moco. Las complicaciones graves de la shigelosis a menudo se asocian con el serotipo S. dysenteriae 1 productor de toxina Shiga y pueden variar desde trastornos intestinales locales hasta manifestaciones sistémicas. EIEC podría causar una colitis inflamatoria invasiva y, ocasionalmente, disentería, pero en la mayoría de los casos EIEC provoca diarrea acuosa que es indistinguible de la debida a la infección por otros patógenos de E. coli. La transmisión convencional de EIEC y Shigella está mediada a través de la ruta fecal-oral, principalmente a través de alimentos o agua contaminados o de la propagación directa de persona a persona.

La adopción de técnicas moleculares ha permitido una detección e identificación más rápida de los diferentes patotipos de E. coli. Por lo tanto, proporciona la información crítica para determinar las terapias apropiadas para los pacientes con sospecha de infecciones por E. coli y el control del brote.