VIASURE Vancomycin resistance Real Time PCR Detection Kit está diseñado para la identificación y diferenciación específica de los genes vanA y vanB asociados con enterococos resisitentes a vancomicina (ERV) en muestras clínicas de pacientes con signos y síntomas de infección bacteriana.

El uso previsto del test es facilitar la identificación de organismos resistentes a la vancomicina en combinación con factores de riesgos clínicos y epidemiológicos.

El DNA es extraído a partir de muestrass clínicas, amplificado posteriormente mediante PCR a tiempo real y detectado utilizando oligonucleótidos específicos y una sonda marcada con una molécula fluorescente y otra apantalladora (quencher) para detectar los genes vanA y vanB.

Los enterococos son organismos comensales comunes que se encuentran en el tracto gastrointestinal y en los genitales femeninos. Recientemente se les reconoce como patógenos oportunistas que causan infecciones nosocomiales como infecciones del tracto urinario, infecciones de la piel, infecciones respiratorias, endocarditis y sepsis en individuos inmunocomprometidos.

La vancomicina es un antibiótico glucopéptido que inhibe la síntesis de la pared celular y se usa para tratar infecciones graves por bacterianas gram-positivas. Los enterococos resistentes a la vancomicina (ERV) se describieron por primera vez en Inglaterra y Francia en 1986, habiéndose extendido en la actualidad a través de los hospitales de todo el mundo.

La resistencia a la vancomicina es un proceso complejo y necesita la presencia de diferentes clusters de genes. Principalmente, se pueden dividir en dos tipos dependiendo atendiendo a los precursores pentapéptidos producidos por genes de resistencia a la vancomicina; el precursor que termina en D-Alanina-D-Serina (VanC-, VanE-, VanG-, VanL- y VanN-type) o el que termina en D-Alanine-D-Lactate (VanA-, VanB-, VanD- y VanM- tipo). Estos precursores pentapéptidos muestran una baja afinidad por los glucopéptidos, confieriendo así la resistencia a la vancomicina en los enterococos.

El primer tipo de resistencia a la vancomicina en los enterococos se considera resistencia intrínseca (ej. Asociada con el gen vanC). Aislados de Enterococcus gallinarum y E. casseliflavus / E. flavescens muestran esta resistencia inherente a la vancomicina de bajo nivel. Mientras que, el segundo tipo es la resistencia adquirida (ej. relacionada con los genes vanA o vanB). En este caso, los enterococos pueden volverse resistentes mediante la adquisición de elementos genéticos móviles (transposones y plásmidos) de otra especie de Enterococcus u organismo. Más comúnmente, esta resistencia se observa en E. faecium y E. faecalis, pero también se ha reconocido en E. raffinosus, E. avium, E. durans y otras especies de enterococos. Los genes vanA y vanB son responsables de una resistencia a la vancomicina alta o moderada. La transmisión de enterococos resistentes a la vancomicina (ERV) puede ocurrir por contacto directo con fluidos corporales de pacientes colonizados o infectados (sangre, drenaje de heridas, orina, heces, esputo y otros) o por contacto indirecto a través de las manos de los trabajadores de la salud, o a través de equipos de cuidado de pacientes o superficies ambientales contaminadas.

Inicialmente, el método de detección más comúnmente aplicado se basó en técnicas de cultivo, que conllevan mucho tiempo y generalmente toman de uno a cinco días para completarse. Para acortar el tiempo de detección y mejorar la sensibilidad, los ensayos de PCR en Tiempo Real han demostrado ser una herramienta para la detección de genes clínicamente relevantes asociados con la resistencia a la vancomicina.